不同艾灸因素对阿尔茨海默小鼠PI3K/AKT通路与皮质β淀粉样蛋白沉淀的影响
刘耀萌 刘钧天 黄 畅 韩 丽 赵百孝(北京中医药大学针灸推拿学院,北京,100029)
不同艾灸因素对阿尔茨海默小鼠PI3K/AKT通路与皮质β淀粉样蛋白沉淀的影响
刘耀萌刘钧天黄畅韩丽赵百孝
(北京中医药大学针灸推拿学院,北京,100029)
目的:观察艾灸、艾烟、无烟灸干预对APP/PS1小鼠大脑皮质PI3K/AKT通路相关指标和β淀粉样蛋白沉淀的影响,从能量代谢的角度探索艾灸不同作用因素在防治阿尔茨海默病中的机制。方法:将32只5个月龄雄性APP/PS1阿茨海默病模型小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾烟组、无烟灸组,每组各8只,并将8只同月龄雄性C57BL/6小鼠作为空白对照组。空白组、模型组小鼠每日常规抓取、固定于正常环境;艾灸组与无烟灸组小鼠每日抓取、固定后取关元穴灸治;艾烟组小鼠每日抓取、固定后暴露于10~15 mg/m3艾烟环境。所有干预20 min/d,6 d/周,共8周。于第10周取材。ELISA法检测各组小鼠大脑皮质中IRS-1、PI3K、AKT、GSK-3α、IDE的含量,刚果红染色检测大脑皮质区β淀粉样蛋白沉淀情况。结果:皮质中IRS-1含量比较显示,模型组低于空白组(P1 材料与方法
1.1实验动物及分组本实验选用5个月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠作为阿尔茨海默病模型,小鼠体重为(26.32±2.2)g,以具有相同遗传背景的同月龄雄性野生C57BL/6小鼠作为空白对照组,小鼠体重为(26.62±1.96)g。所有小鼠均为SPF级,购买于北京华阜康生物科技股份有限公司(动物许可证号:SLXK京2009-0007),饲养于北京中医药大学SPF屏障实验室,饲养环境由人工控制,干净卫生,通风良好,每日光照12 h,定期紫外线消毒,保持环境温度为20~25 ℃,相对湿度为50%~65%。所有小鼠单笼饲养,予普通饲料喂养(购买自北京维通利华实验动物有限公司),所有小鼠自由进食饮水。
小鼠适应性喂养1周后,干预8周。将32只APP/PS1小鼠按随机数字表法分为模型组、艾灸组、艾烟组、无烟灸组,共4组,将8只C57BL/6小鼠作为空白对照组。
1.2主要实验材料、仪器及试剂定制普通艾条、无烟艾条:规格为直径0.5 cm×长度20 cm,均购买自河南安阳汉医艾绒有限公司;自制小鼠固定器:呈拱桥状,规格约为150 mm×65 mm,底部由白色树脂片制成,中间留有小孔,可暴露小鼠腹部;拱部由透明有机玻璃制成,四周留有小孔,可供小鼠将头部、四肢、尾部伸出并固定;自制固定器支架:规格为30 cm×12 cm×30 cm ......
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