云南藤黄提取物对人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用及其机制研究(2)
1.1.3 药物 云南藤黄(Garcinia yunnanensis)采集于中国云南省,由中国科学院西双版纳热带植物园王洪教授鉴定,样品保存在上海中医药大学创新中药实验室。云南藤黄的果皮经剥离粉碎成粗粉,取100 g果皮粗粉,用500 mL 95%乙醇于室温浸泡24 h后,90 ℃加热回流3次,第2次与第3次均为500 mL,每次1 h。合并3次滤液,浓缩至浸膏。实验前定量称取,紫外线照射灭菌,无菌蒸馏水溶解,4 ℃冰箱保存备用。1.1.4 试剂 5-氟脲嘧啶(5-FU)为上海旭东海普药业有限公司生产(批号:20070802),抗体,四甲基偶氮唑盐MTT购自Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养
人肠癌SW620细胞于含10%胎牛血清的L-15培养液(含青霉素、链霉素各100(U/mL)中,37 ℃、5% CO2、饱和湿度培养箱中常规培养。每2~3 d传代1次,取对数生长期细胞用于实验。
1.2.2 模型制备与分组
取对数生长的人肠癌SW620细胞 ......
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