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编号:13619505
缺血再灌注损伤脑微血管内皮细胞Necroptosis模型的建立(1)
http://www.100md.com 2017年2月15日 《世界中医药》 20174
     摘要目的:采用拟缺血再灌注损伤结合zVADFMK(BenzyloxyearbonylValAlaAspfluoromethylketone,zVADFMK)干预,探索一种脑微血管内皮细胞(Brain Microvascular Endothelial Cells,BMECs)Necroptosis模型。方法:首先利用原代大鼠脑微血管内皮细胞,采用氧糖剥夺及复氧复糖方法,筛选出拟缺血再灌注损伤时间点。在拟缺血再灌注模型基础上,予Casepase抑制剂zVADFMK 20 μmol/L干预,采用CCK8检测细胞活性;透射电镜观察细胞超微结构;Annexin VFITC/PI(Propidium Iodide)双染色法检测细胞死亡方式。结果:确定氧糖剥夺2 h复氧复糖8 h,作为拟缺血再灌注时间点;zVADFMK作用于拟缺血再灌注损伤BMECs后,细胞活性无统计学意义;zVADFMK干预组在电镜下呈现明显的Necroptosis特征;流式检测显示 ......
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