然而叶盘法诱导需要经历预培养、共培养、选择培养、愈伤形成等过程，诱导周期长并且毛状根的遗传转化需要在无菌的环境中进行，具有一定的风险。而对土培植物直接进行侵染诱导出毛状根相比之下更为简便，通过在组织上划出伤口，将发根农杆菌直接接种在伤口处，共培养一段时间后，在植株接种部位能够诱导产生毛状根。该方法已经成功应用在乌拉尔甘草和桑树等药用植物研究中[6-7]。本研究拟在重要药用植物丹参中建立原位毛状根侵染诱导体系，以丹参酮生物合成途径重要修饰酶基因CYP76AH1为目的基因[8]，构建RNAi载体，转化发根农杆菌，侵染土培丹参植株的根茎部位，得到既含有丹参自身主根、须根，又含有目的基因RNAi片段转基因毛状根的复合型丹参植株，利用绿色荧光蛋白筛选转化毛状根以用于基因表达和代谢物谱分析。通过建立丹参毛状根的原位侵染诱导的方法，为丹参酮下游基因功能研究提供新方法。

    1 材料

    1.1 药物 植物材料唇形科鼠尾草属植物紫花丹参(Salvia miltiorrhiza)。实验材料为发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)诱导此丹参生成的毛状根。菌株和载体发根农杆菌C58C1为本实验室保存菌种 ......