雷公藤单加氧酶基因全长克隆及表达分析(2)
鉴于单加氧酶对药用植物的生长发育和中药活性成分生物合成的重要性,本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到一条MO基因,该基因全长2193 bp,具有完整的开放阅读框,共编码507个氨基酸。通过生物信息学分析,初步分析了该基因编码蛋白的生物学功能。此外,本文研究了TwMO基因在茉莉酸甲酯诱导下的表达方式,为进一步研究TwMO基因在雷公藤中的作用奠定基础。1 仪器与试药
1.1 仪器 2-16K型低温冷冻离心机(Sigma公司),MM400型混合型球磨仪(Retsch公司),VeritiTM 96孔梯度PCR仪(ABI公司),GBOXHR型紫外凝胶成像分析仪(Syngene公司),QuantStudio 5 Real-Time PCR System(ABI公司)等。
1.2 试剂 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(Thermo公司生产),Fast Quant cDNA第一链合成试剂盒、快速小提质粒试剂盒和RNA纯化试剂盒(天根生化科技(北京)有限公司生產) ......
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