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编号:13581729
细胞学方法评价南美草药阿萨伊的寒热药性(3)
http://www.100md.com 2018年6月1日 《世界中医药》 201811
     1.2.3.2 对细胞能量代谢的影响 1)分组与处理:取9 cm细胞培养皿进行试验,实验设置4个组,包括3个不同浓度的阿萨伊药液受试组和空白对照组。当HepG2和Hep3B人源型肝癌细胞株处于对数生长期时,弃培养液,用胰酶消化洗脱,收集细胞悬液以1000 r/min离心10 min,弃上清,用PBS洗涤细胞2~3次,1000 r/min离心10 min,弃洗液,用细胞培养基调整细胞密度为1.5×10 6/L,充分混匀后接种于9 cm培养皿,每个皿所含细胞总数为3×10 6个细胞,接种后将细胞置于37 ℃、5%CO2细胞培养箱中孵育24 h,待观察到细胞贴壁后,弃培养基,每皿加入6 mL含相应浓度阿萨伊溶液的培养液,空白对照组加入6 mL细胞培养液,然后将培养皿置于CO2细胞培养箱中孵育24 h。2)细胞NADH含量及NADH/NAD +比值的变化:按“辅酶I NAD(H)试剂盒说明书”的方法操作,提取2种细胞中的NADH和NAD +,分光光度法检测并计算细胞中2种物质的含量,以nmol/104 Cells表示,并计算NADH/NAD +比值。实验重复3次。

    1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件对数据进行统计学分析 ......
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