中药饮片中真菌毒素前处理方法进展(3)
1.2.1 特异性净化方法 免疫亲和层析(Immune Affinity Column,IAC)法基于抗原抗体反应,抗体连接在免疫亲和柱内,样品中的黄曲霉毒素经提取过滤、稀释,滤液缓慢经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和柱层析净化,黄曲霉毒素交联在层析递质中的抗体上。这种净化方法特异性强,回收率高,操作简便,选择性强,但价格昂贵。2015版药典规定对黄曲霉毒素的净化采用此方法[4]。朱迪等[22,26,31,41,43]通过玻璃纤维滤纸滤过的提取液均通过免疫亲和柱净化,首先用水洗涤杂质后甲醇洗脱真菌毒素,测定回收率均在75% ~90%之間。郑荣等[35,37]对丹参、大枣、苦杏仁、白苏子等中药的提取液通过免疫亲和柱净化,回收率在60% ~110%之间。郝爱鱼等[29]将120批中药澄清的溶液直接使用免疫亲和柱净化,回收率为95% ~110%。Katerere D R等[7]使用不同的免疫亲和柱净化AFB1、和FB1、FB2。他将滤过0.45 um的滤液通过Aflatest column免疫亲和柱净化AB1、Strong Anionic Exchange Columns净化FB1、FB2、FB3。Ali N等[18]将助溶过滤后得到的澄清液通过免疫亲和柱净化后得到真菌提取液,通过HPLC柱后衍生测定AFB1、AFB2、AFG2 3种真菌毒素。YangYing等[34]得到供试液后直接通过免疫亲和柱净化 ......
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