紫杉醇配合卡铂在老年宫颈癌患者中的应用评价(3)
1.7.2 病灶癌细胞增殖的检测 取患者宫颈病变组织样本约200 mg,放入含TRIZOL试管内,添加氯仿后离心,取出水相层,用等体积异丙醇沉淀,提取质粒RNA,进行病灶癌细胞增殖基因mRNA检测。待沉淀物干燥后,添加DEPC水,使用反转录试剂盒(赛默飞世尔科技公司生产,货号:K1622),按照说明,进行cDNA的合成实验,然后使用同厂家生产的PCR扩增试剂盒,进行目标基因扩增。扩增条件为94 ℃2 min→94 ℃30 s→54 ℃30 s→72 ℃60,30个循环→72 ℃10 min,按照计算机所得曲线得出相应基因mRNA含量[5]。病灶癌细胞增殖的观察指标有PTEN基因(Gene of Phosphate and Tension Homology Deleted on Chromsome Ten,PTEN)、抑癌基因FHIT(Fragile Histidine Triad,FHIT)、新型共刺激分子B7-H4、低氧诱导因子-1α(Hypoxia Inducible Factor-1α,HIF-1α)、骨髓瘤细胞Sp2、斯钙素1(Stanniocalcin1 ......
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