1.7 观察指标 1)肾功能指标测定：采用高效液相色谱法(1260型，安捷伦)测定糖化血红蛋白;采用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖;采用全自动生化分析仪测定肌酐(SCr)、内生肌酐清除率(Ccr)、血清尿素氮(BUN)水平。2)PKC活性测定：采取患者清晨空腹静脉血，红细胞分离，加入缓冲液A(蔗糖0.25 mol/L、Tris/HCL 20 mmol/L、EGTA 10 mmol/L、EDTA 2 mmol/L)0 ℃条件下进行超声粉碎，然后4 ℃，3 000 r/min条件下离心1 h，取上清液，离心机(DG Spin;北京佰利申科贸有限公司)，之后将其加入到DEAE纤维素柱中，再采用缓冲剂B(Tris/HCl 20 mmol/L、2-ME 50 mmol/L、LEGTA 5 mmol/L、EDTA2 mmol/L)进行洗涤处理，收集为胞质洗脱液待测。将膜蛋白提取液加入到沉淀物中，超声粉碎，同样条件下离心1 h，过柱，收集为胞膜洗脱液。反应体积为50 μL，并以组蛋白为底物，参考Lowrry法进行蛋白定量测定，反应混合液位Cold ATP 0.25 mmol/L、0.5%Ⅲ-S型组蛋白、1%PS、CaCl2 12.5 mmol/L、MgAC 25 mmol/L、pH 7.5，0.5 mmol l/LTris/HCl ......