1.2.3 生长曲线测定 取4支50 mL无菌离心管，每只离心管中加入30 mL肉汤，于1、2、3管内加入上述实验中配置的菌液1.5 mL(菌液终浓度为5×105 CFU/mL)，前三管为平行实验组，第4管不加菌，为阴性对照组。将离心管放置于恒温震荡器中进行震荡培养，温度37 ℃，转速200 r/min。在菌液震荡培养的0～24 h中，每隔1 h使用酶标仪测定菌液的OD570nm值，对OD570nm值用统计软件进行分析，绘制标准生长曲线，确定PCR实验中所需MDRPA菌株样本的最佳培养时间。

    1.2.4 实时荧光定量PCR分离提取总RNA 1)培养细菌：挑取单个细菌菌落分别置于含TZP、中药水提物的营养肉汤及纯营养肉汤中，37 ℃过夜振荡(200 r/min)培养，收集5 mL含菌培养液，10 000 r/min离心1 min，尽量吸净上清。往沉淀中加入1 mLRNAzol RT，反复吹打裂解细胞，裂解液转移至2 mL离心管中。2)相分离：每1 mLRNAzol RT加入400 mL ddH2O ......