1.2.3.4 免疫组化法观察肺组织p38MAPK蛋白表达 石蜡切片常规脱蜡至水，PBS洗涤3次;用pH 6.0柠檬酸缓冲液(CB)热诱导修复，室温自然冷却后洗涤3次;0.3%H2O2抑制内源性过氧化物酶室温20 min;PBS洗滌3次;20%正常羊血清室温孵育30 min;滴加p38MAPK一抗(1∶200)37 ℃孵育2 h;PBS洗涤3次;EnVision试剂(HRP/R)37 ℃ 30 min;PBS洗涤3次;DAB显色8～12 min;苏木素衬染色，热水蓝化;吹干后，树脂封片;镜下观察，背景呈紫蓝色，阳性产物呈棕黄色或黄色。采用Image Pro Plus6.0图像分析软件，对免疫组化结果进行图像采集和定量分析。高倍镜下每张切片随机选择不相重叠的6个视野，计算每例样本蛋白染色阳性面积率(阳性细胞面积÷总面积)作为比较参数。

    1.5 统计学方法 采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析。实验结果以均数±标准差(±s)表示，组与组之间采用单因素方差分析。任意2组患者之间若满足正态分布且方差齐，采用独立样本t检验;若方差不齐，需校正方差分析;若不符合正态分布，则用非参数检验Kruskal-Wallis H方法，以P<0.05为差异有统计学意义 ......