“三棱-莪术”组分配伍介导PI3K-AKT通路治疗大鼠子宫肌瘤的研究(3)
1.2.3.4 酶联免疫吸附试验(ELISA) 检测E2和ER子宫均浆组织,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测E2、ER,包被、封闭酶标反应孔、洗涤、加入待检测样品、加入酶标抗体、加入底物液、终止反应等过程均严格按照说明书进行,检测时一定要首先进行标准品的复孔设置,使标准曲线的可靠性加强。1.2.3.5 Western blot检测PI3K/AKT信号通路 裂解液各组大鼠子宫组织,取上清;采用BCA法测蛋白浓度;将等量蛋白(50 μg)上样至SDS-PAGE凝胶电泳2 h;PVDF膜转膜,条件:100 V,100 mA,2 h;5%脱脂奶粉封闭2 h;PI3K、AKT、p-AKT和GAPDH一抗抗体孵育,4 ℃過夜后;加入HRP标记二抗;用化学发光法系统对蛋白条带进行显影及拍照分析。
1.3 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析,计量数据以均数±标准差(±s)表示,采用t检验;计数资料用例(%)表示,进行χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 “三棱-莪术”组方对子宫病理形态的影响 空白组的子宫组织形态学显示子宫平滑肌细胞排列、体积及数量均正常,排列有序未见明显病变;模型组显示子宫平滑肌纤维排列紊乱无序 ......
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