1.1.3 试剂

    1.2 方法

    1.2.1 分组与模型制备

    1)慢病毒转染分组：选取空白组、空转染慢病毒载体对照组、NALP6干扰表达慢病毒载体组。

    2)NALP6信号转导通路在痛风性关节炎发病过程中的作用机制研究分组：每3孔为一组，共分为4组：a.空白组：正常滑膜细胞;b.模型组：滑膜细胞+尿酸钠;c.模型空转染组：滑膜细胞+尿酸钠+空转染慢病毒载体;d.模型NALP6转染组：滑膜细胞+尿酸钠+NALP6干扰慢病毒载体。

    模型制备：将大鼠成纤维样滑膜细胞进行原代培养并留取第三代细胞用于后续实验，加入MSU溶液制备成痛风性关节炎模型。

    1.2.2 检测指标与方法

    1)慢病毒转染：通过ddCt RQ(Relative Quantitation)以扩增公式2-△△Ct对NALP6的表达量进行分析计算。

    2)NALP6信号转导通路在痛风性关节炎发病过程中的作用机制研究：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质印迹法(Western blotting)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等技术检测细胞中NALP6蛋白、caspase-1、IL-1β、核因子-κB的表达情况 ......