水蛭分子鉴定方法的研究进展(3)
2 蛋白质标记技术蛋白质标记技术[52]是从蛋白质层面对中药材进行快速、准确的鉴定,包括抗血清鉴定技术、蛋白质电泳鉴定技术、同工酶鉴定技术以及蛋白飞行时间质谱鉴定技术,但将抗血清鉴定技术运用于水蛭鉴定还需进行进一步研究探索。
2.1 蛋白质电泳鉴定技术
蛋白质电泳鉴定技术[52]是依据中药中所含蛋白质分子的大小、形状或所带电荷差异,采用电泳分离来鉴定中药的方法,常用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和毛细管电泳(CE)。丁月珠[53]对蚂蟥清水吊干品、菲牛蛭干品、菲牛蛭鲜品采用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测3种水蛭样品对纤维蛋白原的作用,结果发现蚂蟥清水吊干品对纤维蛋白原有水解作用,尤其是对α、β链的作用较强,而菲牛蛭干品与菲牛蛭鲜品对纤维蛋白原均无此作用。因此,SDS-PAGE法可将蚂蟥与菲牛蛭成功鉴别。
2.2 同工酶鉴定技术
同工酶鉴定技术[52]是依据待鉴定中药中同工酶的分子结构、活性以及免疫原性等的特异性,使用酶活性分析、电泳检测等技术来鉴定中药品种的方法。罗媛媛等[54]对日本医蛭和天目山蛭的4种同工酶(ES、MDH、POX、LDH)采用垂直平板聚丙烯酰胺凝膠电泳进行比较研究 ......
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