山茱萸bHLH2基因的克隆与分析(3)
2.2 CobHLH2克隆与测序利用Primer Premier 5.0软件，在转录本c101916_g1序列的ORF两端设计特异性引物(CobHLH2-F和CobHLH2-R)。以山茱萸的第一链cDNA为模板，RT-PCR扩增后经1.0%的凝胶电泳检测，结果见图2所示。回收纯化该亮带，与载体pTOPO-T连接，转化感受态DH5α，经菌液PCR鉴定，挑选阳性菌液测序。测序结果去除污染载体序列，获得长度为1 047 bp的CobHLH2目的片段。
2.3 CobHLH2编码蛋白的特征分析
利用NCBI提供的ORFfinder工具预测，CobHLH2序列含有一个完整的ORF，长795 bp，共编码264个氨基酸。ProtParam分析表明，CobHLH2蛋白分子式为C1268H2030N370O411S8，相对分子质量为29.29 kDa，其理论pI值8.77。利用ProtScale工具分析CobHLH2蛋白的亲/疏水性 ......
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