丹参酮合成相关的SmCYP81C16基因克隆和功能研究(4)
2.6 UPLC检测转基因毛状根中丹参酮类化合物含量 毛状根在液体培养基中震荡培养4个月后取出拍照,烘干后称重,使用球磨仪打粉,每100 mg毛状根用0.5 mL甲醇提取,提取物超声处理30 min,8 000 r/min离心10 min,用0.22 μm尼龙过滤器将上清过滤至棕色液相小瓶中,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm;Waters);检测波长,255 nm;柱温,25 ℃;流速,0.25 mL/min;进样量,2 μL,流动相:甲醇(A)-水(B),梯度洗脱条件为20%~60% A(0~5 min),60%~70% A(5~20 min),70%~80% A(20~25 min),80%~100% A(25~26 min),100% A(26~30 min)。記录各化合物的峰面积,每个样品设3个生物学重复。2.7 代谢组学分析转基因毛状根中丹参酮类化合物含量 将丹参样本在液氮冷冻下粉碎研磨成粉末后 ......
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