Western blotting检测：干预结束后从各组大鼠中随机选取3只大鼠，麻醉处死后冰上将大鼠脑袋迅速取出，并分离出海马组织，加入1 mL的RIPA裂解液和10 μL PMSF进行组织裂解，充分反应后将样本置于4 ℃，12 000×g分离15 min，吸取上清液后加入4X蛋白上样缓冲液，在金属浴仪中进行蛋白变性7 min，将样品加入至事先配制好的SDS-PAGE电泳凝胶内，总蛋白两30 μg、电泳结束后将目标蛋白转移至聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)，转膜后用脱脂奶粉封闭2 h，用0.01 mol/L磷酸缓冲盐溶液(PBS)冲洗干净后分别加入PI3K、Akt、p-Akt、Bcl-2、Bax以及β-actin一抗抗体，4 ℃下孵育24 h，次日取出PVDF膜后用TBST清洗3次，10 min/次，加入辣根过氧化物酶标记的二抗(1∶1 000)室温下孵育1 h，加入ECL溶液，反应1 min后进行曝光扫描，用Image J软件扫描条带灰度值。

    1.3 统计学方法

    采用SPSS 20.0统计软件进行数据分析。计量资料用均数±标准差(±s)来描述，组间比较采用两样本t检验或两样本秩和检验;组内比较采用配对t检验或配对秩和检验 ......