2.2 PCR扩增和高通量测序 提取到的DNA经检验合格后，扩增真菌ITS2序列，引物为ITS3(5′-GCATCGATGAAGAACGCAGC-3′)和ITS4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)[11]。PCR扩增程序如下：95 ℃变性5 min;再进行35个循环(95 ℃变性45 s，58 ℃退火50 s，72 ℃延伸45 s);最后72 ℃延伸10 min。将同一样本3个重复的PCR产物混合后用2%琼脂糖凝胶电泳检测，使用DNA凝胶回收试剂盒(Axygen公司，美国)切胶回收PCR产物，Tris_HCl洗脱，2%琼脂糖电泳检测。Illumina MiSeq PE250高通量测序委托北京奥维森基因科技有限公司完成。

    2.3 数据分析 使用Quantitative Insights into Microbial Ecology(QIIME，Version 1.8，http：//qiime.org)软件对测得的fq数据进行过滤处理[12] ......