基于蛋白质组学技术测定全蝎中β-肌动蛋白的含量(4)
通过对已知浓度的酶解溶液进行稀释,直至待测溶液中特征肽段的定量离子的信噪比(S/N)接近3时计算得到方法检出限(Limit of Detection,LOD)为0.04 mg/kg,当定量离子的信噪比(S/N)接近10时计算得到方法定量限(Limit of Quantitation,LOQ)为0.13 mg/kg。2.11 样品测定结果
按照所建立的检测方法对市售的37批全蝎药材进行检测,经标准曲线分析,得到供试品溶液中特征肽段的摩尔浓度,同时运用了凯氏定氮法测定了全蝎样品中的蛋白质总量,含量在317~604 g/kg,通过计算后得到样品中2组β-肌动蛋白的含量数据,一组为β-肌动蛋白占样品干重之比(以样品计),另一组为β-肌动蛋白占总蛋白之比(以总蛋白质含量计)。见表8。
3 讨论
3.1 目标蛋白质及其特征肽段的选择
3.1.1 高分辨质谱鉴定特征肽段的方法
供试品溶液制备:称取药材粉末约1.5 g至15 mL离心管中,精密称定。精密加入10 mL PBS缓冲溶液 ......
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