1.7.3 ICC的数量变化 经正常山羊血清37 ℃封闭30 min，去封闭液，加PBS稀释好的一抗，放湿盒中4 ℃过夜。1×PBS清洗3 min×3次，加二抗试剂，37 ℃孵育20 min。加荧光二抗，1×PBS清洗3 min×3次。DAPI复染10 min，1×PBS清洗3 min×3次。滴加防荧光淬灭剂封片，用荧光显微镜拍照观察。

    1.7.4 直肠组织中的c-kit及SCFmRNA表达变化 将获取的直肠组织冷冻标本(约50 mg)，手工研磨至粉末状;转入RNA专用的1.5 mL EP管中，每管加入1 mL trizol液，在室温中静置约30 min。提前讲低温离心机预冷，将上述准备的EP管放入离心机中(4 ℃，12 000 r/min，离心半径5 cm)离心5 min，讲EP管取出。转移EP管中上清液至另外准备的EP管中，按0.2 mL/1 mL比例加入氯仿。同样放入低温离心机(4 ℃，12 000 r/min，离心半径5 cm)离心15 min。再次将上层液体转移至EP管中，再等体积加入异丙醇 ......