王欢 丁海涛 舒骏 王瑞茵 齐蕊涵 史榕荇 杨帆 唐学章

    摘要 目的：測定舒筋活络方(SHC)对骨关节炎(OA)患者滑膜成纤维细胞(FLS)增殖、迁移、侵袭的影响，明确其作用机制。方法：对胶原酶法分离培养的FLS进行形态学观察，通过MTT比色法、划痕实验、Transwell实验、ELISA法等技术测定SHC对FLS增殖、迁移、侵袭等的影响。结果：体外分离的FLS生长状态良好，具备成纤维细胞形态特性;所选药物浓度范围对FLS增殖影响较小，与空白组比较，较高浓度和低浓度的SHC对FLS增殖的影响差异均有统计学意义(P95%，可用于后续实验研究。在×100倒置显微镜视野下，可见FLS遍布视野，增殖分裂旺盛，呈极向旋涡状分布，有簇状聚集的细胞集落。见图1。×400倒置显微镜视野下，可观察到FLS贴壁良好，具备成纤维细胞形态特性，细胞体积均较大，具有生长突，呈长梭形、纺錘形，偶见星形、多角形，包质丰富，折光性好，胞核呈卵圆形，位于细胞中央。见图1。

    2.2 SHC对FLS增殖的影响 在前期研究中，我们对2 mg至1 μg浓度范围的SHC对FLS细胞活性的影响做了大区间的整体筛选。为了有利于后续试验，本研究选取了对FLS生长影响较小的浓度范围进行进一步的测定。在所选的SHC浓度区间中，随SHC浓度逐渐降低，IR逐渐升高，SF逐渐降低，FLS增殖由促进逐渐转向抑制，呈规律的浓度依赖性;与空白组比较，当SHC浓度为800～50和0.781 μg/mL时，实验结果差异有统计学意义(P<0.05);但从各组均值来看，各浓度对FLS的增殖影响程度均较轻，IR在-27.034%～11.549%范围内，SF在127.034%～88.451%范围内，IR和SF均未大幅度偏离空白组，变化趋势较平缓，结合之前对差异浓度SHC影响FLS炎症介质释放等实验结果 ......