孙艳华 李明 徐建立 董路 曹学彬 孟小晶

    摘要 目的：研究紫草素通過激活活性氧(ROS)自由基诱导大肠癌细胞凋亡的作用机制。方法：通过MTT测定法检测紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力的影响，结合Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Caspase 3/9活性测定试剂盒检测半胱天冬酶活性，使用ROS检测试剂盒检测紫草素处理对HCT116和SW480细胞中ROS水平的影响，并借助Western Blotting检测Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达情况。结果：细胞活力检测结果显示，人正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460对紫草素干预不敏感，而紫草素对人结肠癌细胞系HCT116和SW480细胞活力表现出显著的抑制作用(均P<0.05)。在紫草素干预后，Western Blotting分析检测到细胞周期蛋白D、c-Myc、Bcl-2和Bcl-xL蛋白表达水平显著下调(均P<0.05)。同时，紫草素以剂量依赖性方式上调了Caspase3和Caspase9蛋白表达水平(均P<0.05)。流式细胞术检测结果表明，经10 μmol/L紫草素处理24 h后，HCT116和SW480细胞凋亡率增加至59.2%和65.6%，而几乎没有坏死细胞(Annexin V-，PI+);并检测到HCT116和SW480细胞线粒体膜电位被去极化。ROS水平检测结果显示，紫草素以剂量依赖性方式上调了HCT116和SW480细胞ROS水平。结论：紫草素通过线粒体介导途径诱导结肠癌细胞凋亡，Bcl-2蛋白家族和细胞内ROS水平升高在该过程中发挥重要作用。

    关键词 紫草素;结肠癌;活性氧;细胞凋亡;细胞增殖;细胞活力;Bcl-2家族蛋白;线粒体

    Shikonin by Activating Reactive Oxygen Species ROS to Inducing Apoptosis in Colorectal Cancer Cells ......