李 黎 孙 川 刘 莉 邓 洁 晏 菲 魏武杰

    (湖北省第三人民医院肿瘤内科，武汉，430000)

    胃癌是临床上常见的消化道恶性肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居第2位，是全球发病率和病死率最高的恶性肿瘤之一[1-2]。一般情况下胃癌发生早期无明显症状，易被忽略，因此胃癌早期诊断较为困难，给临床治疗带来了极大困难[3]。临床上胃癌治疗多以化疗或手术切除为主，化疗不良反应大，同时对患者的身心影响大，因此寻求更加安全有效的药物，减少药品不良反应，是目前胃癌治疗的一个难题。近年来研究结果表明，中药活性成分毒性低，作用靶点多，对于恶性肿瘤的防治作用备受关注，显示出了巨大的潜力。

    鱼藤素(Deguelin，De)是植物中常见的鱼藤酮类化合物，药理学研究显示具有显著的杀虫、抑制生长发育的作用[4-5]。研究表明，鱼藤素对癌症的抵抗作用显著，尤其是抑制肺癌、舍鳞癌和肝癌等恶性肿瘤有明显作用[6-8]。相关研究显示，鱼藤素可对蛋白激酶(AKT)进行选择性抑制，从而对癌细胞起到一定抑制作用。AKT信号通路的活化在胃癌、肝癌等多种恶性肿瘤发生过程中具有重要作用。Ho等[10]研究表明，在胃癌肿瘤中AKT基因过表达。但是，目前尚未有研究表明鱼藤素可以抑制胃癌细胞基因从而导致癌细胞死亡。因此，本研究采用人体胃癌细胞进行实验，探索鱼藤素作用于胃癌细胞的机制，为防治胃癌提供严谨科学的理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞 SGC-7901人类胃癌细胞，来自于中科院生物化学与细胞生物学研究所，许可证：SYXK(京)2016-0001，干冰运输的冻存细胞，液氮保存，长期有效。

    1.1.2 药品 鱼藤素，上海源叶生物科技有限公司，批号：522-17-8，纯度>95%。

    1.1.3 试剂与仪器 AKT过表达质粒载体(汉恒生物科技有限公司，批号：12390912)DMEM高糖培养基(Gibco公司，美国，批号：12491-015)、胎牛血清(Gibco公司，美国，批号：10099-14-FBS)、青-链霉素(Gibco公司，美国，批号：15070063)等，CCK-8试剂盒(日本同仁化学研究所，日本，批号：CK04)，叉头框蛋白O1(Forkhead Box O1，FoxO1)、B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2，Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bcl-2-associated X Protein,Bax)mRNA、β-肌动蛋白(actin)上下游引物和探针(InvitrogenTM公司 ......