李 玲 刘 杨 夏 凡 张秋莹 王小波 谢明水

    (1 湖北医药学院附属随州医院,随州,441300; 2 湖北医药学院附属随州医院转化医学中心,随州,441300)

    肺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤,占每年新发恶性肿瘤的10%以上,严重威胁人们的生命健康[1]。传统治疗肺癌的手段包括手术、化疗等,而手术治疗存在复发等问题,且很多患者由于发现较晚,错过了手术治疗的最佳时期[2]。化疗药物如顺铂等虽能抑制肿瘤生长,但是存在不良反应大、耐药等问题[3]。因此,开发新的治疗肺癌的药物已成为当今研究的热点。近年来研究发现,一些中药中提取的成分对肺癌具有明显的抑制作用,姜黄素可通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,抑制肺癌细胞浸润与转移[4],刺五加多糖可通过调控Wnt/β-catenin信号通路,对非小细胞肺癌细胞增殖及转移发挥抑制作用[5],灵芝孢子粉及其提取物可通过抑制血管生成,降低肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长[6]。吴茱萸碱是中药吴茱萸中主要的生物碱类物质,具有一定的抗肿瘤作用,体外实验发现吴茱萸碱可促进肺癌细胞凋亡[7]。然而,对吴茱萸碱对肺癌的在体抗肿瘤研究较少[8]。本实验以Lewis肺癌细胞荷瘤小鼠模型为研究对象,评估吴茱萸碱的在体抗肺癌作用,并从调控血管生成及HIF-1α/VEGF信号通路入手,初步探究吴茱萸碱治疗肺癌的在体作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂及仪器 试剂：吴茱萸碱[分子式：C19H17N3O;分子量：303.36 Da;纯度≥98%;化学物质登录(Chemical Abstracts Service,CAS)号：518-17-2]购自四川维克奇生物科技有限公司;顺铂注射液(规格10 mg/支)购自齐鲁制药有限公司(批号：8K029A89);罗斯威尔公园纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute,RPMI)1640培养基(货号：11875119)、胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS,货号：10100147)、青霉素/链霉素(货号：15140148)、胰酶(货号：25200072)购自美国Gibco生物有限公司;RNA提取(货号：DP419)、反转录(货号：KR106-02)、扩增试剂盒(货号：FP205-02)购自天根生物科技有限公司;免疫组织化学一抗VEGF(货号：ab1316)、缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible Factor-1α,HIF-1α)(货号：ab1)、CD31(货号：ab182981)购自英国Abcam生物科技有限公司 ......