徐春丽 张晓阳 顾宏伟 高建忠

    (1 南京市中西医结合医院,南京,210014; 2 山西省中西医结合医院,太原,030013)

    胃癌是全球常见的恶性肿瘤之一,我国是胃癌高发国家,发病率和死亡率均约占全球的50%[1]。目前胃癌的治疗主要以手术联合化疗为主,根治性手术可以切除原发病灶,但在术后有较高的复发转移率,且大多数患者确诊时已属晚期,失去手术机会;术后辅助放化疗,可控制微转移病灶,但会出现严重的不良反应和耐药性,而中医药在抑制胃癌、减轻化疗不良反应方面具有一定的优势[2],因此,寻求有效的中医药治疗成为目前研究的热点。

    基于此,在当代医家主张的病因病机的基础上,高建忠教授以保和消积方治疗胃癌,经多年临床实践验证,疗效良好。保和消积方能取得良好的临床疗效得益于该方以保和丸为底方,所加药物(三棱、莪术、白花蛇舌草)更能消癌散结。该方重用焦山楂消食化积;二陈汤主治痰湿;白花蛇舌草清热解毒,消痈散结[3];三棱、莪术相须而用,破血行气,消积止痛,增强破血消瘤止痛之功[4]。但目前关于保和消积方对胃癌细胞增殖、迁移的影响及其可能的作用机制研究较少。

    微血管形成与胃癌细胞生长与转移存在密切关系,血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)为促血管生长因子,能诱导新生血管形成[5],还有磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)蛋白激酶B(Protein Kinase B,AKT)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin,mTOR)信号通路与恶性肿瘤的相关性成为研究热点,PI3K-AKT-mTOR信号通路与胃癌密切相关[6],该信号通路激活可维持细胞存活,是肿瘤细胞抵抗凋亡的重要机制之一[7],但关于其在保和消积方治疗胃癌中的作用少见报道。本研究将通过观察保和消积方对体外胃癌SGC-7901细胞株生长增殖、凋亡及转移能力的影响,并通过观察保和消积方对胃癌SGC-7901细胞微管生成和血管内皮生长因子的影响,探讨保和消积方抑制胃癌细胞的效果,并基于PI3K-AKT-mTOR信号转导通路分析其作用机制,为胃癌的治疗提供一定的参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞 胃癌SGC-7901细胞株购自璟源生物科技有限公司(批号：C6795),培养于添加10%胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS,Thermo Fisher Scientifc公司,美国,批号：SH30084.02)、100 U/mL青霉素(河南仟德药业有限公司,批号：130437-201707)和链霉素(深圳市贝尔医药科技有限公司,批号：130308-201514)的RPMI-1640培养液中,并置于37 ℃、5% CO2饱和湿度的培养箱中常规培养,用含乙二胺四乙酸(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,EDTA)的0.25%胰蛋白酶消化传代种板,放入-80 ℃冰箱保存备用 ......