韩亚光 宋思钰 孙小惠 韩延华 朱小琳

    (1 黑龙江中医药大学附属第一医院,哈尔滨,150040; 2 黑龙江中医药大学,哈尔滨,150040;3 黑龙江中医药大学附属第二医院,哈尔滨,150001)

    子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)指正常脱落的子宫内膜上皮细胞种植在腹壁、卵巢等位置,常见于育龄期妇女,主要临床表现为下腹痛、不孕、性交痛。该病发病率逐年上升,达10%～20%[1],不孕妇女中发病率更高,严重影响患者身心健康。目前其发病机制尚不清楚,雌激素依赖性疾病、炎症性疾病是对EMs的统一认识[2]。西医治疗EMs主要是以激素和手术为主,但不良反应大或有创伤性损伤[3]。近年来中医疗法在治疗EMs等慢性疾病中被广泛认可,针刺治疗灵活、不良反应少,深受EMs患者青睐,越来越多的研究表明针刺能够缓解EMs疼痛、抑制异位组织血管生成和侵袭黏附、调节免疫功能及内分泌,改善相关症状[4-8]。本课题组探究其疗效及作用机制,现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 选取6周龄未孕健康Sprague-Dawley(SD)清洁级雌性大鼠47只,体质量190～210 g,由黑龙江中医药大学动物实验中心提供,动物合格证号:SCXK(黑)20180004。实验大鼠饲养于黑龙江中医药大学妇科实验室,日常保持饲舍温度(23±2)℃,湿度(55±5)%,自然采光,对实验动物采用自由饮水和采食。所有实验均遵守黑龙江省中医药大学动物伦理研究委员会发布的伦理指南(伦理审批号:GLWJ-ZD-019)。

    1.1.2 器具 毫针:贵州安迪牌针灸针,规格为0.25 mm×40 mm,贵州安迪药械有限公司产。改良后使用。

    1.1.3 试剂与仪器 原位末端凋亡法(TdT-mediated dUTP Nick End Labeling,TUNEL)细胞凋亡原位检测试剂盒(上海翌圣生物科技有限公司,货号:40308ES20);兔抗鼠磷脂酰肌醇3激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)试剂盒(CST公司,美国,货号:4249);蛋白激酶B(Protein Kinase B,AKT)(CST公司,美国,货号:4691);哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin,mTOR)试剂盒(CST公司,美国,货号:2983);兔抗胱天白酶-3(Caspase-3)试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司,批号:201901029);Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X Protein,Bax)试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司,批号:20190118);B细胞淋巴瘤2(B Cell Lymphoma 2,Bcl-2)试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司,批号:20190302);核糖核酸(Ribonucleic Acid,RNA)提取试剂盒[天根生化科技(北京)有限公司,货号:DP430];反转录试剂盒(Vazyme公司,货号:R211-01);荧光定量聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)试剂盒(Qiagen公司,美国,货号:208054) ......