张秀文 魏明清 倪敬年 李 婷 时 晶 田金洲

    (北京中医药大学东直门医院,北京,100700)

    阿尔茨海默病(Alzheimer′s Disease,AD)是一种慢性进行性的神经退行性疾病,是导致痴呆的最常见的原因,占痴呆患者总数的60%～80%[1]。2019年国际阿尔茨海默病协会估计:全世界有超过5 000万的痴呆症患者,到2050年将增加到1.52亿[2]。随着老龄化社会的到来,预测2030年我国的患病人数将超过2 000万[3]。这将给社会、医疗和家庭带来沉重的负担。同时,AD的发病机制尚未完全明确,目前已知的发病机制有β淀粉样蛋白(Amyloid β-protein,Aβ)异常沉积、tau蛋白过度磷酸化导致的神经纤维缠结(Neurofibrillary Tangles,NFTs)、神经炎症反应、线粒体功能障碍、氧化应激以及细胞凋亡等[4]。但不幸的是,针对单一发病机制的一系列药物研究在临床试验阶段都没有获得很好的临床效果[5-7]。故而目前认为AD是由多因素共同作用引起的,治疗也应当针对多种因素进行多靶点治疗。

    中医以整体观念和辨证论治为基本特点,是一种多靶点治疗的方法,随着近年来国外药物研究的失败,中医疗法受到了广大医务工作者的关注。阿尔茨海默病是由髓减脑消、神机失用所导致的神智异常疾病,属于中医学的“痴呆病”,临床以呆傻愚笨、智力低下、善忘等为主要表现[8],病性为本虚标实,本虚在于肾精不足,标实在于痰浊、瘀血蒙蔽脑窍[9]。《阿尔茨海默病的中医诊疗共识》指出AD早期以肾虚为主;中期痰、瘀、火并现;晚期为痰、瘀、火日久而化生毒浊所致,治疗方面当遵循补肾原则,分期辨证治疗[10]。四物汤,出自宋代的《太平惠民和剂局方》,主要记载用于妇产科疾病,主要作用为补血和活血,由熟地黄、白芍、当归、川芎等中药组成,逐渐被后世医家认为“可治一切血证”“血证立法”。基于现代药理研究和临床应用研究,基于“虚”“瘀”的病机,四物汤被认为可用于多类病的治疗[11]。

    本文探析从“血”论治AD的理论依据,并利用网络药理学方法对“调理一切血证”的四物汤用于AD的作用机制进行全面研究[12],为后续研究的开展提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞 人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y细胞株)(由北京中医药大学东直门医院实验室提供)。

    1.1.2 药品 四物颗粒(吉泰安,批号:Z20020016);盐酸多奈哌齐片(安理申,批号:H20050978)。

    1.1.3 试剂与仪器 人工合成Amyloid Peptide 25-35(Aβ25-35)(万生昊天,型号:C-PT0104220301),高糖培养基(Dulbecco′s Modification of Eagle′s Medium,DMEM)(HyClone,美国,货号:SH40007.01),澳洲胎牛血清(Gibco,美国,货号:10099-141),青-链霉素溶液(Gibco,美国,货号:15140-122),BCA试剂盒(碧云天,货号:P0012),CCK-8检测试剂盒(日本同仁化工,日本,货号:CK04),聚偏二氟乙烯膜(Polyvinylidene Fluoride,PVDF)(Millipore,美国,货号:IPFL00010),B细胞淋巴瘤-2(B-cell Lymphoma-2,Bcl-2)抗体(ABclonal,货号:WH260030),二抗(Abcam,美国,货号:ab6702),CO2恒湿培养箱(Esco,新加坡,型号:170L),离心机(Eppendorf,德国,型号:5804),倒置显微镜(Olympus,日本,型号:CKX41),多功能酶标仪(BioTek,美国,型号:SYNERGY H1) ......