TIMP-1对人牙周膜成纤维细胞增殖与ALP活性表达的影响
牙周组织,磷酸酶,1材料与方法,1材料及仪器,2人PDLF细胞体外培养,3方法,4统计学处理,2结果,1MTT检测结果,2ALP检测结果,3讨论
高晓林,李 瑛(山西医科大学第二附属医院口腔科,山西太原 030001)
金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)是天然的基质金属蛋白酶(MMPs)抑制剂,存在于大多数组织和体液中。通过调节MMPs活性维持细胞外基质(ECM)的内环境稳定及组织重建[1]。目前,TIMPs已发现有 4 种类型:TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4[2]。 其中,TIMP-1一直是分子细胞生物学研究的重点,随着研究的不断深入,发现TIMP-1是一种多功能蛋白,除了可以调节ECM代谢之外,TIMP-1还能调控细胞增殖分化、凋亡、迁徙、血管生成等,这些功能并非完全通过抑制MMP的途径[3]。但TIMP-1对牙周膜成纤维细胞(periodontal ligament fibroblasts,PDLF)的生物学特性的影响报道较少。本实验的目的是观察外源性TIMP-1对体外培养的PDLF的生长增殖和ALP活性表达的影响。
1 材料与方法
1.1 材料及仪器
人重组金属蛋白酶组织抑制剂-1(recombinant human TIMP-1,Peprotech,USA);DMEM(culbecco's modified eagle media)培养液(Gibco,USA);胎牛血清(FBS,杭州四季青生物工程材料有限公司);碱性磷酸酶试剂盒(南京建成生物工程研究所);25 ml塑料培养瓶、96 孔板(Orangescientific);CO2培养箱(AshevilleNC,USA);Unic7200分光光度计(上海尤尼柯仪器有限公司)。
1.2 人PDLF细胞体外培养
将储存在液氮中的第3代PDLF取出后迅速置于37℃水浴箱中加热 ......
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