扁平苔藓皮损中MIF、MMP-9的表达及意义
基底膜,免疫组化,1材料与方法,2试剂,3方法,4结果判定,5统计学分析,2结果,1扁平苔藓组织与正常皮肤组织中MIF,MMP-9的表达水平,2扁平苔藓与正常皮肤组织中MIF,MMP-9mRNA的表达水平,3讨论
王 慧,白 莉(山西医科大学第一医院皮肤科,山西太原 030001)
扁平苔藓(lichen planus)是一种病因不明的慢性或亚急性炎症性皮肤病,其组织学特征显示为上皮基底细胞的液化变性、基底膜带损伤。目前关于其基底膜带损伤机制的研究甚少。本文旨在检测扁平苔藓中MIF、MMP-9的表达,进一步探讨两者与扁平苔藓基底膜带损坏的关系。
1 材料与方法
1.1 材料
病例组30例均系2008~2009年在我院皮肤科就诊,经临床和病理确诊的扁平苔藓患者。其中,男17例,女13例;年龄20~64岁,平均41.9岁。所有患者在半年内均未使用过激素和免疫抑制剂治疗。于患者典型皮损处取材。对照组30例为同期在我院整形科、普外科所取的正常皮肤组织,其中,男20例,女10例;年龄 18~60岁,平均37.6岁。两组患者年龄、性别差异无统计学意义,具有可比性。各标本取材后分两份,一份经中性福尔马林液固定,石蜡包埋后用于免疫组化染色;另一份予以液氮迅速冷冻后置于-80℃冰箱保存,用作RT-PCR实验。
1.2 试剂
兔抗人MIF多克隆抗体为美国Santa Cruz公司产品,兔抗人MMP-9多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。二步法PV-6000免疫组织化学检测试剂盒由北京中杉金桥生物技术有限公司提供。MIF、MMP-9引物由上海生工生物工程技术有限公司合成。
1.3 方法
1.3.1 免疫组化法 采用PV-6000二步法:备用标本进行4 μm厚连续切片后脱蜡,3%H2O2去离子水阻断内源性过氧化物酶; 滴加一抗 (MIF浓缩液1∶150稀释,MMP-9浓缩液1∶100稀释),37℃孵育 1 h; 滴加二抗 PV-6000 ......
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