张 红，马 博

    (1.广西医科大学研究生学院，广西南宁 530021；2.广东公安边防总队医院生殖中心，广东深圳 518029)

    上游法是较早用于分离精子的技术之一，由于其操作简便也是现在多数生殖实验室使用的精子优选方法[1]。上游法的原理就是活力高的精子可以从离心后的精液沉淀中游出至上层的培养液中[2]。随着辅助生殖技术的不断发展，优选精子的上游法也有了其衍生方法。本研究主要比较两种改良上游法对IVF的受精结果的影响。第一种上游法为：将精子洗涤液(美国 Quinn's)与精液1∶1充分混匀，若精液不液化，则反复吹吸使之液化，然后置于15 ml离心管中，用700×g离心力，离心5 min，离心后去上层液体，将精液沉淀吸出后缓慢置于装有0.5 ml卵裂液HTF(美国 Quinn's)的5 ml试管底部，然后放置于5%二氧化碳，37℃温箱中培养15～25 min后将上悬浊液吸出放于另一无菌的5 ml小试管，待用。此种上游法简称先离心法，其优点是：操作简单，节省试验耗材，能最大程度地回收精子。缺点是：离心后高密度的有缺陷的精子及白细胞会产生高浓度的活性氧，进而使正常精子受到损害[3]，而且在吸取上悬浊液时容易混入死精子及其他杂质。第二种上游法：取3～4支10 ml圆底试管，每支试管加入1.5 ml精子洗涤液，将精子洗涤液与精液1∶1混匀并反复吹吸 ......