多孔细菌纤维素-聚乳酸乙醇酸-羟基磷灰石复合支架的制备及性能研究
表面,1仪器与试剂,1主要仪器,2主要试剂,2方法与结果,1方法,2统计学方法,3结果,3讨论
姚志文 王红忠 蔡 琛 杨 安 刘 唯 李红玖 程由勇 李春华 陈治清1.广州医学院附属深圳沙井医院口腔科,广东深圳 518104;2.四川大学华西口腔医学院口腔材料教研室,四川成都 610041
组织工程支架材料应用时,单一的材料往往难以同时满足生物体对其力学强度、亲水性、易成型性和生物相容性等多方面的要求,为了尽量同时满足这些要求,人们往往通过几种生物材料的组合来达到预期目的。基于这个思路,本课题选用细菌纤维素(bacterial cellulose,BC)、聚乳酸乙醇酸(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)和羟基磷灰石(HA)通过溶剂浇铸/粒子浸出法制备多孔BC-PLGA-HA复合支架,分析其相关理化性能,通过体外MG-63细胞培养,初步评价其体外生物相容性及在组织工程中的应用可行性。
1 仪器与试剂
1.1 主要仪器
电热恒温鼓风干燥箱(跃进医疗器械厂,上海),CO2培养箱(Sanyo,日本),LDZ5-2台式离心机(北京医用离心机厂),YJ-1450型超净工作台(苏净集团安泰公司,江苏),倒置相差显微照相系统(Olympus,日本),JSM-6360LV电子显微镜(EJOL,日本),HTS7000 plus多孔板紫外/荧光/可见光高效分析仪(PE,美国)。
1.2 主要试剂
高糖 DMEM 培养基(Gibco,美国),胎牛血清(Gibco,美国),胰蛋白酶(Gibco,美国),四甲基偶氮唑盐(MTT)(Sigma,美国),二甲基亚砜(Sigma,美国),乙二胺四乙酸(Sigma,美国),Braford蛋白含量检测试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司),碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司),成骨样细胞MG-63(四川大学口腔疾病国家重点实验室)。
2 方法与结果
2.1 方法
2.1.1 多孔BC-PLGA-HA复合支架的制备
取1.0 g的PLGA和5 mL氯仿配成溶液,加入经过目筛的粒径为 100~200 μm 的 NaCl晶体 1.0 g和 HA 0.3 g,磁力搅拌和超声振动使其均匀分散。室温下将以上配好的PLGA溶液倒入底层铺有BC膜的玻璃皿中。静置24 h,干燥后PBS液反复漂洗,冷冻干燥后裁剪成直径5 mm圆片 ......
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