复合膳食纤维对急性重症胰腺炎大鼠肠黏膜上皮紧密连接蛋白和肌球蛋白轻链激酶的影响
屏障,小肠,1资料与方法,1动物与试剂,2动物模型的建立,3实验分组,4检测指标,5统计学方法,2结果,1肠内营养支持治疗后三组大鼠小肠组织损伤评分比较,2三组小肠黏膜occlud
杨吉荣 王蕊娜 武 华1.山西医科大学研究生学院,山西太原 030001;2.山东协和学院,山东济南 250100;3.山西医科大学附属第一医院普外科,山西太原 030001
重症急性胰腺炎(SAP)是临床上一种常见的急腹症,病 情险恶,死亡率高,不仅表现为胰腺局部的病理损伤,而且常常涉及明显的全身炎症反应及并发多器官损伤。肠屏障功能受损后引发的肠道细菌易位是其继发感染和脓毒症的主要原因[1]。研究证实多种细胞因子和炎性介质的释放是造成肠道屏障损伤、肠道通透性增加和肠源性感染的原因。复合膳食纤维(DFC)是不易被消化的食物营养素,能清肠通便,帮助消化,减轻受损肠黏膜的损害,改善肠黏膜的微生态,促进肠道功能的恢复,保护肠黏膜屏障。本实验通过建立大鼠重症急性胰腺炎模型,探讨复合膳食纤维(DFC)对肠屏障功能的影响,为临床应用提供依据。
1 资料与方法
1.1 动物与试剂
健康成年Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重200~220 g。瑞素(肠内营养乳剂)、膳食纤维(包括可溶性和不可溶性膳食纤维)由华瑞制药有限公司提供。occludin、ZO-1以及肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的试剂盒由北京博奥森生物技术有限公司提供,DAB显色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.2 动物模型的建立
采用胰胆管逆行注射法复制SAP模型。Wistar大鼠造模前自由饮水,禁食24 h,腹腔内注射3%戊巴比妥钠溶液(0.1 mL/100 g)麻醉。采用腹部正中切口打开腹腔,近十二指肠乳头开口处用无创血管夹夹闭胰胆管,距左右肝管汇合处1 cm处用1 mL注射器穿刺胰胆管,并在该部位用无创血管钳夹闭胰胆管防止逆流,缓慢推注5%的牛黄胆酸钠(0.1mL/100 g)。远近端夹闭胰胆管10 min[2] ......
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