高建明 Erle S.Robertson▲

    1.三峡大学医学院病理生理学教研室，湖北宜昌443002；2.美国宾夕法尼亚大学医学院微生物学教研室，宾夕法尼亚费城19104

    卡泼肉瘤病毒复制转录激活因子调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义

    高建明1Erle S.Robertson2▲

    1.三峡大学医学院病理生理学教研室，湖北宜昌443002；2.美国宾夕法尼亚大学医学院微生物学教研室，宾夕法尼亚费城19104

    目的研究卡泼肉瘤病毒(Kaposis′s sarcoma-associated herpesvirus，KSHV)编码的复制转录激活因子(replica tion and transcription activator，RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义。方法突变Bcl-2启动子第1个与第2个CCN9GG样序列，构建了新的报告质粒(命名为pGL3-△RRE1,2)，用荧光素酶试验和染色质免疫共沉淀进一步验证CCN9GG样RTA反应元件的功能。构建RNA干扰慢病毒载体，筛选稳定感染的BC3细胞，佛波酯诱导48 h后，分别用PCR、PI(碘化吡啶)染色流式细胞术检测病毒子DNA和细胞凋亡率。结果突变第1个与第2个CCN9GG序列导致启动子活性显著降低；染色质免疫共沉淀试验证实RTA蛋白与CCN9GG序列存在直接相互作用。用RNA干扰技术抑制Bcl-2基因后，佛波酯诱导的KSHV阳性细胞与对照组细胞相比凋亡率增加，病毒子产生减少。结论KSHV RTA能够调控内源性细胞凋亡信号通路，延缓溶解性感染宿主细胞的凋亡，并促进病毒子产生。

    复制转录激活因子；Bcl-2；表达上调；抗凋亡；溶解性感染

    卡波肉瘤病毒(Kaposis's sarcoma-associated herpesvirus，KSHV)复制转录激活因子(replication andtranscriptionactivator，RTA)是ORF50编码的一种即刻早期蛋白，是促使病毒从潜伏性感染向裂解性感染转变的关键调控因子。无论是外源性还是内源性来源引起的RTA表达增高，均可介导病毒裂解性基因的级联表达[1]。RTA主要通过两种方式激活下游靶基因：一是直接与高亲和性的RTA反应元件(RTA responsive elements，RREs)结合[2]；二是间接地与细胞内的一些转录因子结合发挥调控作用，这些转录因子包括K-RBP[3]、CEBP-α[4]、Oct-1[5]和RBP-JК[6]等 ......