徐立春 陈海燕 文 洁 陶亚玲

    扬州大学医学院肿瘤防治研究中心，江苏扬州 225001

    莪术醇对人胃癌细胞凋亡、MMP2、NO影响的初步探讨

    徐立春 陈海燕 文 洁 陶亚玲

    扬州大学医学院肿瘤防治研究中心，江苏扬州 225001

    目的 初步探讨莪术醇(Curcumol)对人胃腺癌细胞(SGC-7901细胞)凋亡、基质金属蛋白酶(MMP2)、一氧化氮(NO)的影响。 方法 将莪术醇溶于无水乙醇中，初始浓度为9 mg/mL，设实验1、2、3、4、5组，莪术醇的浓度分别是7.5、15、30、60、120 μg/mL，并以含 1%无水乙醇的培养液为对照组。 采用台盼蓝(Trypan blue)、噻唑蓝(MTT)法检测SGC-7901细胞的活性及莪术醇对SGC-7901细胞抑制增殖的影响；用流式细胞仪 (FACSCalibur)检测莪术醇对SGC-7901细胞的凋亡率；用蛋白质印迹法检测莪术醇作用于SGC-7901细胞后，其MMP2的表达情况；NO试剂盒检测莪术醇作用SGC-7901细胞后的细胞培养液上清的NO含量。 结果30μg/mL的莪术醇在药物浓度与抑制肿瘤生长方面效果较佳，与对照组比较，其抑制肿瘤细胞增殖差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 材料

    ①莪术醇 (纯度95%)：扬州大学中西医结合研究所提供。②RPMI-1640培养基：美国GIBCO公司；③Annexin VFITC试剂盒：上海晶美生物工程有限公司；④Braford检测蛋白含量试剂盒、Mouse Anti-actin、山羊抗兔IgG-HRP、山羊抗鼠IgG-HRP：武汉博士德生物工程有限公司；⑤Rabbit Anti-MMP2：美国eBioscience公司；⑥NO试剂盒：南京建成生物公司；⑦MTT、DMSO：上海生工生物工程有限公司；⑧细胞株：人胃腺癌SGC-7901细胞株由上海细胞生物所提供。

    1.2 方法

    1.2.1 将莪术醇溶于无水乙醇溶液，其工作浓度中乙醇的最终浓度为1%，设实验组和对照组，实验组莪术醇的浓度为7.5、15、30、60、120 μg/mL。SGC-7901 细胞复苏后加入 RPMI1640培养液(pH=7.2，10%小牛血清，青霉素及链霉素各100 U/mL)后置于CO2培养箱中培养，2～3 d传代一次。用对数生长期的细胞进行实验。

    1.2.2 采用MTT法检测不同浓度组的莪术醇对人胃腺癌SGC-7901细胞细胞增殖的影响。将对数生长期的SGC-7901细胞计数接种于96孔培养板 ......