外源性瘦素对硫代乙酰胺致急性肝损伤保护机制的研究
1材料及方法,1主要试剂,2动物分组及模型制备,3血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肿瘤坏死因子(TNF)水平检测,4核因子-κB(NF-κB)和TNF-αmRNA表达检测,5
黄国荣 丁忠阳 张家明南京医科大学附属无锡市人民医院,江苏无锡 214023
肝损伤是由各种原因引起的肝脏功能的异常,严重或持续的肝损伤最终导致肝功能衰竭。临床上造成的急性肝损伤原因主要有病毒感染、服药不当、乙醇摄入过量、误服有毒食物等。目前肝损伤的防治在国内外是个严峻的课题。通过建立急性肝损伤动物模型,研究其发生机制,筛选保肝药物及其原理,具有重要的现实意义。最近研究表明,瘦素对胃,小肠、肺、肾、胰腺、心脏等器官的损伤具有保护作用[1]。但在硫代乙酰胺(Thioactitmide,TAA)所致急性肝损伤中作用如何,目前研究较少。本实验旨在探讨外源性瘦素在TAA所致急性肝损伤中的作用及机制。
1 材料及方法
1.1 主要试剂
肿瘤坏死因子α(TNF-α)放射免疫试剂盒购于北京尚柏生物医学技术有限公司。Trizol试剂购自Sigma公司。逆转录试剂盒购自上海生物科技公司。PCR引物基因序列通过GeneBank获得,设计通过Primor 5.0软件完成,上海生物工程公司合成。硫代乙酰胺院国药集团化学试剂有限公司生产。
1.2 动物分组及模型制备
36只雄性Wistar大鼠,体重230~250 g,清洁级,由吉林大学医学实验动物中心提供。大鼠分为正常组、TAA造模组及外源性瘦素预处理组,每组12只。TAA造模组予TAA 200 mg/kg腹腔注射,外源性瘦素预处理组于建立急性肝损伤模型前1 h腹腔内注射瘦素 200 mg/kg,造模步骤同TAA造模组;正常组不造模。予同等剂量0.9%氯化钠溶液腹腔注射。三组大鼠分别于造模后24 h处死 ......
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