刘春艳 李 程

    泸州医学院附属医院儿内科，四川泸州 646000

    小儿肺炎是儿科最常见疾病，其病原菌最常见的是细菌和病毒，也可以由细菌和病毒“混合感染”。发达国家小儿肺炎病原以病毒为主，发展中国家则以细菌为主，近年来肺炎支原体衣原体有增加趋势。为了解四川省泸州地区小儿肺炎病原学流行特点，了解病原学分布概况，以期为临床提供可靠信息，指导临床合理用药，本研究对1500例小儿肺炎进行了多种病原联合检测，现分析总结如下：

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    收集泸州医学院附属医院儿内科2011年1～12月收治的初诊为小儿肺炎1500例，全部病例均符合《实用儿科学》小儿肺炎诊断标准[1]，年龄最小29 d，最大14岁；男823例，女677例 。

    1.2 方法

    每例患者经临床初步诊断为小儿肺炎后以即行静脉采血2 mL，采用间接免疫荧光法测定其特异性抗体，其具体步骤如下：①3000 r/min 离心5～10 min 取上层血清。②用25 μL 磷酸盐缓冲液(PBS)按 1∶1 比例稀释血清样本，将稀释后的血清加入150 μL 抗人免疫球蛋白吸附剂中，彻底混匀。③在载玻片(由西班牙VIRCELL，S.L.公司提供，10 孔/片含有下列抗原：第1 孔：嗜肺军团菌血清1型；第2 孔：McCoy 细胞中的肺炎支原体，第3 孔：Q 热立克次体；第4孔：肺炎衣原体；第5 孔：HEp-2 细胞中的腺病毒；第6 孔：HEp-2 细胞中的呼吸道合胞病毒；第7 孔：LLC-MK2 细胞中的甲型流感病毒；第8 孔：LLC-MK2 细胞中的乙型流感病毒；第9 孔：LLC-MK2 细胞中的副流感病毒；第10 孔：质控孔)。每孔中加入15 μL 吸附剂处理过的血清。④将载玻片放入湿盒中，37 °C 温育90 min。⑤用PBS 的缓慢水流冲洗载玻片，浸泡在PBS 中并放置在水平摇床上轻轻摇动10 min，再用蒸馏水缓慢水流冲洗。⑥载玻片自然晾干后每孔加入15 μL FITC 底物 (荧光素标记的抗人IgM 磷酸缓冲液)再次放入湿盒，37 °C 温育30 min 加入一小滴封闭介质盖上盖玻片。⑦用荧光显微镜在400倍视野下观察 ......