孔圣枕中丹对自发性高血压大鼠前额叶皮质及纹状体TH、DAT、DRD1、DRD2蛋白和基因表达的影响
甲酯,1材料与方法,1实验动物,2主要仪器与试剂,3孔圣枕中丹煎剂的制备,4实验动物分组及处理,5取材,6免疫组织化学法,7原位杂交法,8统计学方法,2结果,1
陈晓刚 谭丽丽 赖东兰 许双虹 李宜瑞1.广州中医药大学第一附属医院儿科,广东广州 510405;2.广州市第八人民医院儿科,广东广州 510060
注意缺陷多动障碍(attentiondeficithyperactivitydisorder,ADHD),是以注意力不集中、多动、冲动等为主要表现的常见儿童行为障碍,严重危害儿童的身心健康。以哌甲酯为代表的中枢兴奋剂虽是目前治疗ADHD的首选,但也存在不良反应较多、管理困难等诸多问题[1]。大量临床实践发现,中医药治疗ADHD具备独特优势[2-3]。本研究检测了孔圣枕中丹煎剂对ADHD动物模型——自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)前额叶皮质及纹状体(含伏核)中的酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运体(DAT)、多巴胺D1受体(DRD1)、多巴胺D2受体(DRD2)的基因和蛋白表达的影响,并与盐酸哌甲酯对照,现报道如下:
1 材料与方法
1.1 实验动物
SPF级雄性8周龄的SHR大鼠36只,体重240~300 g,由四川省医学科学院四川省人民医院实验动物研究所生产供应部提供[许可证号:SCXK(111)2008-16]。
1.2 主要仪器与试剂
DAB显色试剂盒,SA1022兔IgG试剂盒,鼠IgG试剂盒,大鼠IgG试剂盒,原位杂交试剂盒(博士德生物技术有限公司);TH 抗体:兔抗(Miliproe抗体公司);DAT 抗体:大鼠抗体(abcam抗体公司);DRD1抗体:兔抗(abcam抗体公司);DRD2抗体:小鼠抗体(Santa抗体公司)。显微镜(日本OLYMPUS公司CHK2-F-GS型),离心机(上海安亭TGL-16G型),电热恒温水箱(广州东方YH140-1型)。
1.3 孔圣枕中丹煎剂的制备
孔圣枕中丹方由龙骨、龟板、远志、石菖蒲4味中药组成(比例 4∶2∶1∶2),广州中医药大学第一附属医院门诊部药房提供生药,制成水煎剂,并配成含生药约1.154 g/mL的溶液,充分搅匀,贮于4℃冰箱备用。盐酸哌甲酯(苏州医药集团有限公司)终浓度为0.24 g/L。
1.4 实验动物分组及处理 ......
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