邓丽娟 王洪州▲ 王利民 董发勤

    1.四川绵阳四〇四医院 川北医学院附属第二医院呼吸内科，四川绵阳 621000；2.西南科技大学校长办公室，四川绵阳 621000

    国际上对温石棉的生物安全性存在较大争议[1-2]，一些学者认为温石棉的毒性和温石棉所带金属离子、表面电荷、产地等性质有较大关系。另一些学者认为温石棉的代用纤维也能够引起慢性肺炎，并且发现岩棉纤维可引起基因突变。也有学者认为温石棉与烟溶液联合对人胚肺细胞DNA的损伤具有协同作用[3-6]。由此可见温石棉的代用纤维对人体可能也不安全。本研究利用免疫组化的方法检测肿瘤基因表达，一方面拟证实其毒性，另一方面探讨其致癌的部分机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞来源

    中国仓鼠肺细胞 (Chinese hamster lung cell，V79细胞)购买自四川大学华西医学中心生物医学实验室。

    1.1.2 材料与试剂

    温石棉、四川新康温石棉、陕西陕南温石棉、玻璃纤维、陶瓷纤维、硅灰石、岩棉来自四川西南科技大学实验室。兔抗鼠EGFR、Survivin单克隆抗体购于武汉博士德公司。免疫组化SABC试剂盒(SA1022)购于武汉博士德公司。

    1.2 方法

    1.2.1 制备实验组粉体及其悬液

    将各实验原矿处理成5 μm左右长，具体方法：将实验原矿反复碾压、劈分、剪短后，然后再进行细研磨，之后进行筛选过滤；然后烘干，最后研磨成更细的粉体。电镜图片见图1。用高温杀菌消毒各种实验粉体，配置成 6 个不同浓度：1、2、4、6、8、10 mg/L。

    图1 温石棉及其代用品粉体的扫描电镜图

    1.2.2 免疫组织化学检测肿瘤基因EGFR及Survivin的表达

    1.2.2.1 实验分组 实验共分为7组，实验组包括四川新康温石棉组(A组)、陕西陕南温石棉组(B组)、玻璃纤维组(C组)、陶瓷纤维组(D组)、硅灰石组(E组)、岩棉组(F组)，并设阴性对照组(G 组) ......