叶 婷 宁 勇

    1.华中科技大学同济医学院附属同济医院临床营养科，湖北武汉 430030；2.华中科技大学同济医学院附属同济医院肾内科，湖北武汉 430030

    衰老是增龄过程中不可避免的结果，往往带来多个器官功能受损。 肾脏是一个血供极其丰富的器官，在衰老过程中肾脏表现最为明显。氧化损伤在人体衰老中发挥着重要作用。过氧化物酶增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor gamma，PPARγ)属核激素受体超家族成员，除了具有调解脂质和糖代谢、抗炎调解免疫等重要生理功能，近来还发现其在维持氧化还原稳态方面具有重要意义。核因子E2 相关因子-2(nuclear factor-E2-related factor-2，Nrf2)是新近发现的又一个在氧化应激中起核心作用的转录激活因子。两者是否也在肾脏衰老中发挥作用鲜有报道。 本文拟探讨PPARγ 和Nrf2 在肾脏衰老氧化损伤中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物分组及标本留取

    选择SD 雄性大鼠(华中科技大学同济医学院实验动物中心提供)20 只，常规条件下于实验动物中心分笼饲养，保持12 h 的昼夜循环，室温控制在23℃左右，湿度维持在40%～50%，自由进食水。将10 只大鼠饲养至3 个月龄(相当于成人20 岁)作为青年组，10 只大鼠饲养至24 个月龄(相当于成人80 岁以上)作为衰老组。断头处死放血干净，生理盐水冲洗肾脏。一侧肾脏迅速纵切分割后，一半置于液氮保存，随后-80℃保存留待蛋白质检测中使用，一半留作病理检查；对侧肾脏立即制备组织匀浆。

    1.2 方法

    1.2.1 肾脏组织病理学分析 肾脏组织石蜡切片(2～3 μm)常规脱蜡入水，行PAS 染色，普通光镜下观察肾脏组织病理改变。

    1.2.2 肾脏组织过氧化氢(H2O2)含量测定 肾脏组织匀浆按照H2O2检测试剂盒(BioAssay System's peroxide assay kit，Hayward，CA))说明书进行。

    1.2.3 肾脏组织丙二醛(MDA)测定 肾脏组织MDA 测定采用硫代巴比妥酸法(TBARS)检测试剂盒(Cat#10009055，Ann Arbor，MI)，操作参照说明书进行。

    1.2.4 Western Blot 法 Western Blot 法检测髓过氧化物酶(MPO)、Nrf2、PPARγ 的蛋白表达水平 ......