沈薇 胡金瑶 高伟 赵慧

    沈阳医学院基础医学院，辽宁沈阳110034

    5-氮杂-2'-脱氧胞苷对人胃癌细胞株BGC803生长及死亡相关蛋白激酶基因表达的影响

    沈薇 胡金瑶 高伟 赵慧

    沈阳医学院基础医学院，辽宁沈阳110034

    目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人胃癌细胞BGC803增殖、凋亡及对死亡相关蛋白激酶(DAPK)mRNA表达水平的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理BGC803细胞，设立不含5-Aza-CdR的对照组及3个实验组：5-Aza-CdR 1 μmol/L组、5-Aza-CdR 5 μmol/L组、5-Aza-CdR 10 μmol/L组。CCK-8检测细胞的增殖情况，AnnexinⅤ/PI双染及流式细胞术检测药物处理后细胞凋亡的情况，RT-PCR检测用药前后DAPK mRNA的表达水平变化。结果实验组BGC803细胞增殖速度显著低于对照组，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。RT-PCR结果显示，BGC803细胞中DAPK基本无表达，5-Aza-CdR处理后，细胞中DAPK mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05)。结论5-Aza-CdR抑制BGC803细胞增殖，并促进细胞凋亡，可能与其诱导DAPK基因表达有关。

    5-氮杂-2'-脱氧胞苷曰死亡相关蛋白激酶曰胃癌曰细胞增殖曰细胞凋亡

    胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，每年因胃癌死亡的人数位居癌症死因第2位[1]。胃癌的发生发展是涉及多个基因的复杂过程，与抑癌基因的异常改变密切相关。肿瘤表观遗传学认为基因启动子区CpG岛甲基化是抑癌基因表达下调甚至失活的重要机制，但这种变化是可逆转的，去甲基化药物能够逆转抑癌基因启动子甲基化状态，恢复其正常表达[2]。死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase，DAPK)是一种凋亡正向调节分子，可被肿瘤坏死因子α、神经酰胺、细胞外基质(ECM)存活信号和pl9AFR5等多种因子激活，进而诱导凋亡[3]。有研究表明在头颈部肿瘤、胃癌、肺癌及膀胱癌等多种肿瘤细胞中，DAPK启动子区域DNA高甲基化水平与该基因表达沉默有关[4-7]。Satoh等[8]发现15%的胃癌组织存在DAPK基因启动子区CpG岛甲基化。本文以人胃癌BGC803细胞株为研究对象，研究体外去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine，5-Aza-CdR)对胃癌细胞株增殖、凋亡及细胞中DAPK基因的表达影响 ......