芍药汤对胃肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜核因子-κB DNA结合活性的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
罗敏 李帅军 胡响当 王晓艳 林仁敬 杨周雨湖南中医药大学第二附属医院肛肠科,湖南长沙410005
芍药汤对胃肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜核因子-κB DNA结合活性的影响
罗敏 李帅军 胡响当 王晓艳 林仁敬 杨周雨
湖南中医药大学第二附属医院肛肠科,湖南长沙410005
目的研究芍药汤对胃肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠核因子-κB(NF-κB)DNA结合活性的影响。方法将40只SD大鼠随机分为4组:正常组,模型组,芍药汤组,柳氮磺胺吡啶(SASP)组。制备胃肠湿热型模型,然后采用三硝基苯磺酸(TNBS)制备灌肠法溃疡性结肠炎模型,灌胃治疗10 d后处死大鼠,取新鲜结肠黏膜标本提取核蛋白,利用以酶联免疫吸附测定(ELISA)为基础的Trans AMTMNF-κB P65试剂盒检测各组NF-κB相对活性。结果与正常组比较[(0.263±0.041)],模型组大鼠NF-κB相对活性明显增高[(0.467±0.083)],差异有高度统计学意义(P<0.01);与模型组比较,芍药汤组大鼠结肠黏膜NF-κB相对活性明显降低[(0.271±0.089)],差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论芍药汤能明显降低胃肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠模型结肠黏膜NF-κB相对活性,可能是其治溃疡性结肠炎作用的机制之一。
芍药汤;胃肠湿热;溃疡性结肠炎;核因子-κB
溃疡性结肠炎(UC)的病因和发病机制迄今尚未明确,其中免疫因素在此病中所起的作用越来越受重视,研究已深入到细胞分子水平,特别是近年来研究发现核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)调控着UC患者中细胞因子和细胞黏附分子(cell adhesionmolecules,CAM)的释放,从而参与了UC肠道的炎症和免疫反应。芍药汤出自《素问病机气宜保命集》,具有清热燥湿、调气和血的功效,根据多年的临床研究,对于胃肠湿热型UC,具有良好的疗效,为求进一步明确芍药汤干预UC调节作用机制,本实验通过检测NF-κB的DNA结合活性,从基因水平探讨芍药汤干预UC的机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
清洁级SD大鼠40只,体重180~220 g,购自湖南中医药大学动物实验室[合格证号:SCXK(湘)2011~0003],动物适应性饲养1周。
1.2 实验器材
核蛋白提取试剂盒(武汉博士德生物公司);BCA-100蛋白质定量测定试剂盒(西安晶彩生物科技有限公司);Tarns AMTMNF-κB酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(上海齐一生物物技有限公司);ZFMQ050PE型超纯水器(上海摩勒科学仪器有限公司);3K-30Z型高速冷冻离心机(德国Sigma公司) ......
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