孙莹 孙肃 孙静

    1.辽宁省肿瘤研究所，辽宁沈阳110042；2.辽宁省职业病防治院，辽宁沈阳110005

    金雀异黄素对雌激素依赖靶基因转录的调节作用

    孙莹1孙肃2孙静1

    1.辽宁省肿瘤研究所，辽宁沈阳110042；2.辽宁省职业病防治院，辽宁沈阳110005

    目的观察金雀异黄素(genistein，GNT)对雌激素受体(estrogen receptor，ER)靶基因的转录调节作用。方法采用不同浓度的金雀异黄素(5、10、20 ng/mL)+雌二醇(10 ng/mL)或雌二醇单独处理乳腺癌细胞MCF7，36 h后收集细胞检测金雀异黄素对雌激素反应元件(estrogen response element，ERE)报告基因的转录调控作用，通过定量PCR技术检测金雀异黄素对ER靶基因PDZK1和GREB1转录水平的影响。结果随着金雀异黄素浓度的增高，ER报告基因的转录水平逐渐下降，与之相一致，PDZK1和GREB1的转录水平也逐渐下降，组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论金雀异黄素能够与雌二醇竞争结合细胞表面的ER，并拮抗ER调控的靶基因表达。

    金雀异黄素；雌二醇；雌激素受体；转录调控

    植物中有各种抗炎抗肿瘤作用的活性物质[1]，大豆异黄酮是已知的植物雌激素，在预防和治疗肿瘤、心血管疾病、骨质疏松症和绝经后综合征等方面的作用已经得到广泛认可[2]。金雀异黄素化学名为4，5，7-三经基异黄酮，性状是淡黄色树枝状针晶粉末，熔点(mp)297～298℃，溶于常用的有机溶剂，几乎不溶于水，溶于稀碱中呈黄色。金雀异黄素(又称染料木素)是来源于豆类植物和齿状植物的异黄酮类化合物，可通过影响一系列的细胞信号通路，发挥广泛的预防和治疗肿瘤作用[3-5]。金雀异黄素是一种强力的酪氨酸蛋白激酶和拓扑异构酶抑制剂，通过抑制以上两种酶的活性，达到对癌基因的调控，从而实现多途径抑制肿瘤的生长转移[6]。金雀异黄素(Genistein)增加性激素结合球蛋白合成，从而降低激素生物利用度，降低雌激素依赖细胞增殖活性，减少激素相关肿瘤的发生。但金雀异黄素水溶性很低，直接服用不利于人体吸收[7]，能否降低雌激素的生物利用度，抑制雌激素调控的靶基因表达目前还不明确。金雀异黄素抗癌研究已经成为全球热点，并已取得很大进展[8]。本文通过报道基因及实时定量PCR实验证实金雀异黄素能够和雌二醇竞争乳腺癌细胞表面的雌激素受体(ER)，并抑制ER调控靶基因的表达，现将结果报道如下：

    1 材料与方法

    1.1 材料 ......