王安杏 马望歌 陈方圆 黄 欣 周 娟 郭 宁▲

    1.陕西省宝鸡市中医医院心血管二科，陕西宝鸡721001；2.西安交通大学医学院第一附属医院心血管内科，陕西西安710061

    14-3-3η通过抑制内质网应激反应对H9c2心肌细胞的保护作用

    王安杏1马望歌2陈方圆2黄 欣2周 娟2郭 宁2▲

    1.陕西省宝鸡市中医医院心血管二科，陕西宝鸡721001；2.西安交通大学医学院第一附属医院心血管内科，陕西西安710061

    目的探讨14-3-3η通过抑制内质网应激对异丙肾上腺素(ISO)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法构建pFLAG-14-3-3η重组表达载体转染H9c2心肌细胞，使用ISO建立心肌细胞损伤模型。将培养的H9c2心肌细胞随机分为4组：正常对照组、ISO组、ISO+pFLAG组、ISO+14-3-3η组。流式细胞仪检测H9c2心肌细胞凋亡；Western blot检测H9c2心肌细胞中半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-12、葡萄糖调节蛋白78(GPR78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达情况；采用试剂盒检测各组细胞丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果ISO刺激H9c2心肌细胞后，与正常对照组比较，ISO组细胞凋亡率显著增高(P<0.05)，caspase-3与caspase-12的表达升高(P<0.05)，MDA含量增高(P<0.05)，SOD活性降低(P<0.05)，内质网应激反应标志蛋白GPR78与CHOP的表达显著增高(P<0.05)。转染pFLAG-14-3-3η后再进行ISO处理，与ISO组比较，ISO+14-3-3η组心肌细胞的凋亡率显著降低(P<0.05)，caspase-3与caspase-12的表达明显减少(P<0.05)，MDA含量降低(P<0.05)，SOD活性增大(P<0.05)，GPR78与CHOP的表达显著降低(P<0.05)。结论14-3-3η可以通过抑制内质网应激反应减轻ISO诱导的H9c2心肌细胞损伤。

    14-3-3η；内质网应激；心肌细胞

    内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)是机体在受到有害刺激时做出的自身保护性应答。研究表明，在细胞受到各种刺激的损害时，适宜的内质网应激对细胞有保护作用，而过长时间或过强的内质网应激会导致细胞的保护机制不能与损伤相抗衡，此时内质网稳态受到损害，使细胞凋亡[1]。内质网应激在肿瘤、糖尿病、神经性系统退行性疾病等多种疾病的发生发展中起重要作用[2] ......