鲁 琰 李 伟 朱明月 董 栩 陈 栘 张雪儿 李孟森，4

    1.海南医学院海南省肿瘤发生和干预重点实验室，海南海口 571199；2.海南医学院分子生物学重点实验室，海南海口 571199；3.海南医学院13卓越创新班，海南海口 571199；4.海南医学院肿瘤研究所，海南海口 570102

    乙肝病毒X基因对肝癌Bel7402细胞ras基因表达的影响

    鲁 琰1，2李 伟1，2朱明月1，2董 栩1，2陈 栘1，2张雪儿3李孟森1，2，4

    1.海南医学院海南省肿瘤发生和干预重点实验室，海南海口 571199；2.海南医学院分子生物学重点实验室，海南海口 571199；3.海南医学院13卓越创新班，海南海口 571199；4.海南医学院肿瘤研究所，海南海口 570102

    目的探讨乙肝病毒X基因(HBx)对人肝癌细胞原癌基因ras表达水平的影响。方法将pcDNA3.1载体与HBx基因连接构建真核表达载体pcDNA3.1-HBx，采用脂质体介导转染人肝癌细胞Bel7402，以转染空载体pcDNA3.1的Bel7402细胞为对照，于转染后2、4、8、16 h收集细胞，提取细胞总蛋白并用Western blot技术检测肝癌细胞内n-Ras蛋白表达水平。结果与转染空载体pcDNA3.1的Bel7402对照组相比，转染重组表达载体pcDNA3.1-HBx的Bel7402细胞Ras蛋白表达水平在第2小时明显降低，第4小时Ras蛋白的表达水平仍有降低趋势，但比第2小时表达量有所增加；第8小时和第16小时，Ras蛋白的表达水平与对照组相比明显升高，差异有统计学意义 (P<0.05)。 结论HBx对人肝癌Bel7402细胞Ras蛋白表达有明显影响，HBx持续表达可能对Ras表达有促进作用。

    肝癌；乙肝病毒X基因；Ras

    肝癌(HCC)是世界范围内常见的恶性肿瘤之一，50%以上的肝癌患者分布在中国内地[1]，肝癌已经成为我国严重的健康问题。HBV感染是促进肝癌形成的主要诱因，其相关性高达80%[2]。近年来研究显示，作为乙肝病毒X基因的表达产物(HBx)具有广泛的反式激活功能，其能通过直接或间接的蛋白质间相互作用参与感染肝细胞的信号转导、细胞凋亡和细胞周期调控等过程，在肝细胞癌发生和发展过程中发挥着重要作用[3-4]。

    恶性肿瘤的形成、进展和转移与癌基因、抑癌基因不可逆的积累突变和失调有关，其中，ras基因与肿瘤发生发展的关系引起人们较高的关注。有研究表明，ras在肝癌早期已有表达，ras与其他基因如c-myc基因的协同作用在肝细胞癌变过程中发挥重要作用[5-6] ......