二甲基亚砜对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞的生长影响
刘 兵 王荣申 赵春贞 王晓红 李万忠.潍坊医学院药学院,山东潍坊 6053;.潍坊医学院应用药理学实验室,山东潍坊 6053二甲基亚砜对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞的生长影响
刘兵1王荣申1赵春贞2王晓红1李万忠1
1.潍坊医学院药学院,山东潍坊261053;2.潍坊医学院应用药理学实验室,山东潍坊261053
目的 初步探讨二甲基亚砜(DMSO)对正常与高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)生长、形态的影响。方法 根据细胞培养基中葡萄糖含量及DMSO浓度的不同,采用成组设计方法随机将细胞分为NG组(给予葡萄糖浓度为5.6 mmol/L低糖DMEM完全培养基)、MG组(给予甘露醇浓度为25 mmol/L DMEM完全培养基)、高糖组(HG,给予葡萄糖浓度为25 mmol/L DMEM完全培养基)、DMSO+NG组(给予含0.1%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%DMSO的低糖DMEM培养基)、DMSO+HG组(给予含0.1%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%DMSO的高糖DMEM培养基),以细胞存活率为考察指标,采用MTT法检测不同处理组细胞活力。 结果 与NG组比较,当DMSO终浓度大于0.5%时,DMSO+NG组细胞形态改变,细胞活力有显著性变化,差异有统计学意义(P1 材料与方法
1.1材料
大鼠RMCs购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.2试剂
DMEM(低糖)培养基(美国 Hyclone公司)、DMEM(高糖)培养基(美国Hyclone公司)、青链霉素混合液(100X)(北京Solarbio科技有限公司)、葡萄糖(上海源叶生物科技有限公司)、甘露醇(上海源叶生物科技有限公司)、四甲基偶氮唑盐(MTT)(北京Solarbio科技有限公司)、二甲基亚砜(DMSO)(北京Solarbio科技有限公司)、0.25%胰蛋白酶-EDTA(北京Solarbio科技有限公司)、“四季青”胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司)。
1.3仪器
洁净工作台(SW-OJ-2F,苏净集团苏州安泰空气技术有限公司)、二氧化碳培养箱(0812K2073CE,力康发展有限公司)、低速离心机(22331Hamburg,德国Eppendorf AG)、倒置显微镜(ECLIPSE TS100-F,日本Nikon公司)、高压蒸汽灭菌器 (MLS-3750,日本SANYO公司)、HW-200S离体肠管恒温装置 (HW-200S ......
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