陈明伟+范彬彬+卢华定

    [摘要] 目的 探讨新型透明质酸改性的聚乙烯亚胺-壳聚糖/DNA(CS-g-PEI/pDNA)纳米粒作为治疗骨关节炎(OA)的可行性。 方法 通过复凝聚法制备成CP/pDNA纳米粒，然后通过巯基的原位交联与巯基化的透明质酸(HA-SH)形成交联网络，从而合成HA-CP/pDNA纳米粒；透射电镜观察纳米粒形貌，马尔文粒度分析仪分析其不同构成比(HA-SH∶CP)时的粒径、表面电位等；凝胶电泳阻滞实验检测CP/pDNA的结合力；CCK-8细胞毒性实验检测该基因载体的细胞毒性；以HA-CP/pDNA纳米粒、裸pDNA、CS/pDNA、CP/pDNA纳米粒、LipofectamineTM2000转染软骨细胞，荧光显微镜、流式细胞仪检测基因转染效率。 结果 ①HA-CP/pDNA纳米粒呈较均一的球形，并随HA-SH∶CP质量比的增加，粒径先减小后增大，表面电位电荷逐渐降低。②HA-CP/pDNA纳米粒对软骨细胞毒性远低于LipofectamineTM2000(P < 0.05)。③HA-CP/pDNA纳米粒对软骨细胞转染率较CP/pDNA、CS/pDNA纳米粒大大提高(P < 0.05)。④大量游离HA导致HA-CP/pDNA纳米粒对软骨细胞的转染效率下降。 结论 HA-CP/pDNA纳米粒具有更强的DNA保护能力，对软骨细胞毒性小，转染效率高，并且对软骨细胞具有一定的靶向性。

    [关键词] 透明质酸；CP/pDNA纳米粒；基因治疗；软骨细胞

    [中图分类号] R318.08 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2017)07(c)-0004-06

    [Abstract] Objective To investigate the feasibility of hyaluronic acid modified CS-g-PEI/pDNA nanoparticles and mediated gene transfection against osteoarthritis. Methods CP was engaged with pEGFP into nanopartricles by using complex coaceration method and then covering the CP/pDNA with HA-SH， HA-SH forming disulfide cross-linked gene complex， and on the surface of the CP/pDNA form cross-linked network with HA ......