程涛 伍伟玲 +黄河

    [摘要] 目的 研究肺結核患者Th1/Th2/Treg/Th17免疫应答情况。 方法 选择2013年5月～2016年10月在解放军第四五八医院接受治疗的复治肺结核和初治肺结核患者，分别作为复治结核组(n=38)和初治结核组(n=47)；另取同期体检的健康志愿者作为对照组(n=50)。检测外周血中Th1、Th2、Treg、Th17细胞及相应细胞因子含量，血清中炎症介质的含量。 结果 复治结核组和初治结核组外周血中Th1、Th17及IFN-γ含量均显著低于对照组，Th2、Treg及IL-4、IL-5、IL-10、IL-17、TGF-β、HMGB1、sTREM1、MCP1、HBD2含量均显著高于对照组(P 0.05)，具有可比性。

    1.2 研究方法

    1.2.1 临床标本采集方法 复治结核组和初治结核组在抗结核治疗前采集外周血标本6 mL，对照组在体检时采集外周血标本6 mL。所得外周血标本分为两份，一份离心分离血清并放置在-80℃保存；另一份加入淋巴细胞分离液并离心，吸取外周血单个核细胞并送检流式细胞术。

    1.2.2 流式细胞术检测方法 取外周血单个核细胞，避光孵育CD4、CD25、Foxp3、IFN-γ、IL-4、IL-17的熒光抗体，PBS缓冲液洗涤后加入破膜剂，避光孵育5 min后在流式细胞仪上检测Th1(IFN-γ+CD4+T细胞)、Th2(IL-4+CD4+T细胞)、Th17(IL-17+CD4+T细胞)、Treg(CD4+CD25+Foxp3+T细胞)细胞的含量。实验所用荧光抗体均购买于Santa Cruz公司。

    1.2.3 酶联免疫吸附检测方法 取血清标本，采用酶联免疫吸附试剂盒测定IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-10、IL-17、TGF-β、HMGB1、sTREM1、MCP1、HBD2的含量。实验所用酶联免疫吸附试剂盒均购于上海酶联生物科技有限公司。

    1.3 统计学方法

    采用SPSS 20.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以均数±标准差(x±s)表示，采用方差分析，计数资料采用χ2检验，相关性采用Pearson相关分析，以P < 0.05为差异有统计学意义。

    2 结果

    2.1 三组受试者外周血中Th1、Th2及相应细胞因子含量比较

    复治结核组和初治结核组外周血中Th1及IFN-γ含量均显著低于对照组，Th2及IL-4、IL-5含量均显著高于对照组；复治结核组患者外周血中Th1及IFN-γ含量均显著低于初治结核组 ......