葡萄糖碳源对组成型表达重组人C—反应蛋白的影响
李军明++++++杨丽萍++++++王臣玉++++++赵琪++++++郑清++++++孙成铭[摘要] 目的 探讨不同浓度的葡萄糖对Pichia pastoris组成型表达重组人C-反应蛋白(rhCRP)的影响并筛选出最优葡萄糖碳源。 方法 分别以浓度为0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%(w/v)的葡萄糖作为碳源,利用毕赤酵母菌株组成型表达rhCRP。取不同表达时间的培养基上清进行Western blot检测及灰度比较分析。 结果 毕赤酵母菌株X-33(pGAPZαA/rhCRP)以葡萄糖作碳源组成型表达rhCRP时,1.0%(w/v)的葡萄糖为最优碳源。 结论 葡萄糖碳源的浓度可影响Pichia pastoris组成型表达rhCRP的水平。本研究结果将为rhCRP的进一步优化表达及大规模生产提供有力的实验依据。
[关键词] C-反应蛋白;葡萄糖;碳源;组成型表达;Pichia pastoris
[中图分类号] Q819 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2017)10(c)-0018-04
Influence of glucose carbon source on the constitutive expression of recombinant human C-reactive protein
LI Junming YANG Liping WANG Chenyu ZHAO Qi ZHENG Qing SUN Chengming▲
Department of Clinical Laboratory, Yantai Yuhuangding Hospital, Shandong Province, Yantai 264000, China
[Abstract] Objective To investigate the effect of different concentrations of glucose on the constitutive expression of recombinant human C-reactive protein (rhCRP) in Pichia pastoris, and to screen out the optimum concentration of the glucose carbon source. Methods The different concentrations [0.5% ......
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