罗海恩+毛新展

    [摘要] 目的 探讨NF-κB p65基因沉默对类风湿性关节炎滑膜HFLS-RA细胞增殖及凋亡的影响。 方法 采用阳离子脂质体LipofectamineTM2000转染NF-κB p65的siRNA至HFLS-RA细胞中，利用RT-PCR和Western blot技术分别检测HFLS-RA细胞中NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达情况。噻唑蓝MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖率和凋亡率。 结果 与空白对照组和阴性对照组比较，转染siRNA后的HFLS-RA细胞中NF-κB p65 mRNA、蛋白表达量和细胞增殖率均明显下降，而细胞凋亡率明显升高，差异均有统计学意义(均P 0.05)。Western blot检测结果(图2)显示，siRNA转染组的NF-κB p65蛋白的相对表达水平(0.336±0.042)明显低于空白对照组(0.752±0.056)和阴性对照组(0.715±0.048)，差异有统计学意义(P 0.05)。见表1。

    2.3 各组细胞凋亡水平的变化比较

    流式细胞仪检测结果(图3)显示，空白对照组、阴性对照组和siRNA转染组的细胞凋亡率分别为(9.12±2.16)%、(12.20±3.58)%和(20.20±4.85)%。与空白对照组和阴性对照组比较，siRNA转染组的细胞凋亡率明显升高，差异有统计学意义(P 0.05)。

    3 讨论

    RA是一种严重的常见慢性自身免疫性疾病，表现为关节和关节周围组织的非感染性炎症，最终导致关节坏损或畸形。Vaubel首次从实验室中培养出滑膜细胞 ......