韦晟 刘金春 葛卫红

    [摘要] 目的 探討黄连碱对过氧化氢(H2O2)损伤的血管内皮细胞的保护作用及其机制。 方法 将体外培养的人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)分为对照组、模型组、给药组。对照组加入新鲜培养基，模型组给H2O2刺激4 h，给药组用不同浓度的黄连碱(2.5、5、10、20、40 μmol/L)预处理4 h，再用H2O2刺激4 h。采用MTS法检测细胞活力，荧光探针-二氢乙啶(DHE)染色法检测细胞内活性氧(ROS)，Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡，Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的变化。 结果 与对照组比较，模型组细胞存活率和Bcl-2蛋白的表达明显降低，细胞内ROS含量、细胞凋亡率、caspase-3和Bax蛋白的表达明显升高(P < 0.01);而与模型组比较，给药组细胞的存活率和Bcl-2蛋白的表达均随着给药浓度的增加而逐渐升高，细胞内ROS含量、细胞凋亡率、caspase-3和Bax蛋白的表达均随着给药浓度的增加而逐渐下降，差异均有高度统计学意义(P < 0.01)。 结论 黄连碱是通过抑制H2O2诱导的EA.hy926细胞存活率降低、细胞内ROS升高、细胞凋亡增多、caspase-3和Bax蛋白表达的上调以及Bcl-2蛋白表达的下调，发挥其对H2O2损伤的血管内皮细胞的保护作用，且呈剂量依赖性。

    [关键词] 黄连碱;EA.hy926细胞;氧化应激;细胞凋亡

    [中图分类号] R54? ? ? ? ? [文献标识码] A? ? ? ? ? [文章编号] 1673-7210(2019)01(c)-0004-05

    [Abstract] Objective To investigate the protective effect and mechanism of coptisine on vascular endothelial cells induced by hydrogen peroxide (H2O2). Methods Human umbilical vein endothelial cells (EA.hy926) cultured in vitro were divided into control group， model group and drug administration group. The control group was added with fresh medium， and the model group was stimulated by H2O2 for 4 h. The drug-treated group was pretreated with different concentrations of coptisine (2.5 ......